熒光觀察所需的設(shè)備
隨著生命科學(xué)研究的進步,用于觀察處于生命狀態(tài)的細(xì)胞和蛋白質(zhì)的技術(shù)也得到了發(fā)展。熒光觀察在此過程中發(fā)揮了重要作用。
該技術(shù)使用熒光染料或蛋白質(zhì)作為標(biāo)記來強調(diào)和投射目標(biāo)區(qū)域。在特定的光(激發(fā)光)發(fā)射到物質(zhì)的分子后,光能被吸收,其中的電子被激發(fā)。然后,在返回基態(tài)的過程中發(fā)出稱為熒光的光。
利用這種激發(fā)電子的現(xiàn)象,熒光顯微鏡在其他設(shè)備中使用光源,物鏡和熒光濾光片以使特定波長的光通過。
選擇合適的熒光濾光片對于獲得更好的圖像很重要。濾光片由激發(fā)濾光片和來自光源的特定波長的光通過,該發(fā)射濾光片使樣品發(fā)出的熒光通過。還包括分色鏡以反射特定波長的光并使不同波長的光通過以將激發(fā)光與熒光分離。
zui近,每個制造商都根據(jù)熒光試劑的特性提供了熒光濾光片組(熒光濾光片立方體),因此用戶可以根據(jù)其標(biāo)本選擇合適的組合。
選擇熒光濾光片的要點
在選擇熒光濾光片組(熒光濾光片立方體)時,用戶必須使熒光染料的特性與該激發(fā)和發(fā)射濾光片的波長范圍緊密匹配。每個過濾器的特征如下:
-勵磁過濾器
根據(jù)要支持的光的波長帶的寬度,有窄帶和寬帶濾波器?;旧?,頻帶越寬,您可以獲得的圖像越明亮。但是,通常使用窄帶濾波器來減少對活體樣品的損害。
-排放過濾器
這類濾波器大致分為長通(LP)濾波器,短通(SP)和帶通(BP)濾波器。LP濾鏡僅透射比特定波長更長的波長,而SP濾鏡僅透射比特定波長短的波長。BP濾鏡僅透射特定波長帶中的光。
當(dāng)使用單一熒光試劑時,可以通過使用LP濾鏡獲得更明亮的圖像。另一方面,當(dāng)使用幾種熒光染料時,可以通過使用不同的BP濾鏡獲得每種熒光染料的圖像。
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